Banner

DENGUE VIRUS IgM MIỄN DỊCH BÁN TỰ ĐỘNG

(Cập nhật: 27/11/2017)

DENGUE VIRUS IgM MIỄN DỊCH BÁN TỰ ĐỘNG

I. MỤC ĐÍCH VÀ NGUYÊN LÝ

1. Mục đích

Phát hiện kháng thể IgM kháng virus dengue trong huyết thanh hoặc huyết tương.

2. Nguyên lý

Phát hiện kháng thể IgM đặc hiệu kháng virus dengue dựa trên nguyên lý của kỹ thuật ELISA (miễn dịch gắn enzyme) (VD).

II. CHUẨN BỊ

1. Người thực hiện

-        Người thực hiện: Cán bộ xét nghiệm đã được đào tạo và có chứng chỉ hoặc chứng nhận về chuyên ngành Vi sinh.

-        Người nhận định và phê duyệt kết quả: Cán bộ xét nghiệm có trình độ đại học hoặc sau đại học về chuyên ngành Vi sinh.

2. Phương tiện, hóa chất

Phương tiện, hóa chất như ví dụ dưới đây hoặc tương đương.

2.1 Trang thiết bị

-  Dàn máy ELISA

-  Máy ly tâm

-  Tủ lạnh 20C - 80C

-  Tủ âm sâu (- 200C hoặc - 700C) (nếu có)

-  Micropipette đơn kênh thể tích từ 10 µl đến 1000 µl.

-  Bộ pipetman 8 kênh (nếu có)

2.2 Dụng cụ, hóa chất và vật tư tiêu hao (bao gồm nội kiểm, ngoại kiểm)

Thực hiện xét nghiệm 01 mẫu/lần.

STT

Chi phí hóa chất, vật tư tiêu hao

Đơn vị

Số lượng

 

1

Bông

Kg

0,001

 

2

Dây garô

Cái

0,001

 

3

Tube đựng bệnh phẩm

Cái

1,000

 

4

Sinh phẩm chẩn đoán**

Test

16,000

 

5

Chứng ngoại kiểm âm (nếu có)

ml

0,100

 

6

Chứng ngoại kiểm dương (nếu có)

ml

0,100

 

7

Ngoại kiểm (nếu có)*

 

0.020

 

8

Đầu côn  1000 µl

Cái

3,000

 

9

Đầu côn  200 µl

Cái

5,000

 

10

Giấy thấm

Cuộn

0,100

11

Giấy xét nghiệm

Tờ

2,000

12

Sổ lưu kết quả xét nghiệm

Tờ

0,001

13

Bút viết kính

Cái

0,020

14

Bút bi

Cái

0,010

15

Cái

0,020

16

Khẩu trang

Cái

0,020

17

Găng tay

Đôi

0,100

18

Găng tay xử lý dụng cụ

Đôi

0,020

19

Quần áo bảo hộ

Bộ

0,005

20

Dung dịch nước rửa tay

ml

8,000

21

Dung dịch nước rửa tay

ml

1,000

22

Dung dịch khử trùng

ml

10,000

23

Khăn lau tay

Cái

0,010

 

Ghi chú:

Chi phí ngoại kiểm cho quy trình kỹ thuật được tính cụ thể theo Chương trình ngoại kiểm (EQAS) là 1/50 tổng chi phí dụng cụ, hóa chất, vật tư tiêu hao (vớisố lần ngoại kiểm trung bình 3 lần/1 năm).

Nếu chỉ làm 01 mẫu vẫn phải mở 01 lọ kháng nguyên đủ cho 16 giếng bao gồm 11 mẫu bệnh phẩm + 5 mẫu chứng. Vì vậy nếu làm đơn lẻ 01 mẫu thì 01 bệnh phẩm phải chịu chi phí cho 15 giếng còn lại

3. Bệnh phẩm

Huyết thanh hoặc huyết tương.

4. Phiếu xét nghiệm

Điền đầy đủ thông tin theo mẫu yêu cầu

III. CÁC BƯỚC TIẾN HÀNH

Các bước tiến hành thực hiện theo phương tiện, hóa chất được ví dụ ở trên

1. Lấy bệnh phẩm

Theo đúng quy định của chuyên ngành Vi sinh:

Từ chối những bệnh phẩm không đạt yêu cầu:

2. Tiến hành kỹ thuật

Bộ sinh phẩm Dengue Duo IgM capture ELISA - Pan Bio (VD)

Các Bước

Xét nghiệm định tính dengue IgM

2.1

Để Số lượng sinh phẩm cần dùng ở nhiệt độ phòng 30 phút trước

 

khi làm xét nghiệm

2.2

Đánh số, sắp xếp bệnh phẩm và viết sơ đồ theo thứ tự.

2.3

Chuẩn bị dung dịch rửa

2.4

Pha loãng kháng nguyên

2.5

Pha loãng huyết thanh người bệnh, chứng âm, chứng dương và

 

chứng cut-off

2.6

Trộn đều lượng kháng nguyên đã được pha loãng với một lượng

 

tương đương Mab Tracer.  Phức hợp Antigen - Mab Tracer để ở

 

nhiệt độ phòng trong 1 giờ

2.7

Cho chứng âm, chứng dương, chứng cut-off và bệnh phẩm đã

 

pha loãng vào các giếng của phiến nhựa theo thứ tự hướng dẫn

 

của quy trình

2.8

Đậy phiến nhựa và ủ

2.9

Rửa phiến nhựa

2.10

Lắc nhẹ phức hợp Antigen - Mab Tracer . Nhỏ phức hợp này vào

 

mỗi giếng

2.11

Đậy phiến nhựa và ủ

2.12

Rửa phiến nhựa

2.13

Nhỏ dung dịch hiện màu vào mỗi giếng

2.14

Ủphiến nhựa, không đậy và tránh ánh sáng

2.15

Nhỏ dung dịch dừng phản ứng.

2.16

Đọc độ kết quả  ở bước sóng 450 và 620nm trong vòng 30 phút

 

sau khi dừng phản ứng.

 

IV. NHẬN ĐỊNH KẾT QUẢ

Kết quả được tính theo Đơn vị PanBio như sau:

-  Tính giá trị trung bình của ngưỡng (calibrator) rồi nhân với yếu tố ngưỡng (calibration factor = 0,62). Đây chính là giá trị ngưỡng:

-  Đơn vị PanBio < 9: mẫu thử âm tính, trong huyết thanh không có kháng thể

-  IgM.

-  Đơn vị PanBio = 9 - 11: mẫu thử phải xét nghiệm lại

-  Đơn vị PanBio > 11: mẫu thử dương tính, trong huyết thanh người bệnh có kháng thể IgM.

V. NHỮNG SAI SÓT VÀ XỬ TRÍ

-  Có thể xảy ra hiện tượng âm tính giả hoặc dương tính giả, thông thường do:

-  Thực hiện sai các bước trong quy trình hướng dẫn.

-  Chứng âm và những mẫu bệnh phẩm âm tính bị nhiễm chéo bởi huyết thanh/ huyết tương có nồng độ kháng thể cao.

(Lượt đọc: 1071)

Tin tức liên quan

  • Cấp cứu 115
  • Đường dây nóng
  • Khuyến cáo phòng chống bệnh viêm phổi cấp do vi rút Corona
  • Học tập làm theo lời bác
  • Chương trình mục tiêu quốc gia
  • Đại hội đảng
  • Lịch công tác
  • Hình ảnh hoạt động
  • Câu lạc bộ Tim mạch
  • Câu lạc bộ Tiểu đường
  • Câu lạc bộ Hen - COPD
  • Liên kết web
    • Bộ Y Tế
    • Báo Quảng Ninh
    • Sở Y tế Quảng Ninh
    • Báo cáo hoạt động khám chữa bệnh
    • Bệnh viện Bãi Cháy
    • Bệnh viện Sản nhi Quảng Ninh
    • CDC
    • Chi cục An toàn vệ sinh thực phẩm
    • Bệnh viện Cẩm phả
    • Bệnh viện Đa khoa khuc vực Cẩm phả
    • Bệnh viện Lao và phổi
    • Bệnh viện Phục hồi chức năng Quảng Ninh
    • Bệnh viện Việt Nam Thụy Điển Uông Bí
    • Bệnh viện Y dược cổ truyền Quảng Ninh
    • Trung tâm y tế Hạ Long
    • Trung tâm Y tế huyện Ba Chẽ
    • Trung tâm Y tế huyện Bình Liêu
    • Trung tâm Y tế huyện Đầm Hà
    • Trung tâm Y tế huyện Hải Hà
    • Trung tâm Y tế huyện Hoành Bồ
    • Trung tâm Y tế huyện Tiên Yên
    • Trung tâm Y tế huyện Vân Đồn
    • Trung tâm Y tế Thành phố Cẩm Phả
    • Trung tâm Y tế Thành phố Móng Cái
    • Trung tâm Y tế Thành phố Uông Bí
    • Trung tâm Y tế thị xã Đông Triều
    • Trung tâm Y tế thị xã Quảng Yên
    • Bệnh viện 108
    • Trung tâm DI & ADR quốc gia
    • Bệnh viện Bạch Mai
    • Bệnh viện Đa khoa tỉnh Phú Thọ
    • Bệnh viện Việt Đức
    • Sở Y tế tỉnh Phú Thọ